在體外診斷（IVD）行業(yè)中，涉及的各類(lèi)參考物質(zhì)如參考品、質(zhì)控品、質(zhì)控物、對(duì)照品、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、標(biāo)準(zhǔn)品、校準(zhǔn)品、校準(zhǔn)物等等，在產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、使用、監(jiān)管等過(guò)程中分別發(fā)揮不同的作用。這些參考物質(zhì)定值的準(zhǔn)確性是至關(guān)重要的。
分子診斷產(chǎn)品的參考物質(zhì)定值，通常是指對(duì)參考物質(zhì)中的核酸（DNA或RNA）拷貝數(shù)的測(cè)定。傳統(tǒng)方法，是用基于qPCR平臺(tái)的**定量，主要過(guò)程是合成含有待測(cè)靶標(biāo)序列的質(zhì)粒，測(cè)定高濃度質(zhì)粒的質(zhì)量濃度后按照質(zhì)粒大小換算拷貝數(shù)，再以此高濃度質(zhì)粒為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行梯度稀釋做qPCR 拷貝數(shù)和CT值對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，后續(xù)待測(cè)樣本的CT值帶入標(biāo)曲公式，可得出樣本的靶核酸拷貝數(shù)。這個(gè)方法的主要問(wèn)題在于：
1、質(zhì)粒質(zhì)量濃度檢測(cè)的準(zhǔn)確性。常用的方法為Nanodrop為代表的分光光度計(jì)法，該方法特異性不夠，且較易受雜質(zhì)影響，在純度不好的情況下，結(jié)果偏差可能有5倍、甚至超10倍的偏差。做標(biāo)曲用的質(zhì)粒濃度不對(duì)，后續(xù)的整個(gè)定量實(shí)驗(yàn)都是不成立的了。
2、qPCR的定量計(jì)算基于CT值換算，而CT值會(huì)受到很多因素影響：試劑擴(kuò)增性能、引物探針設(shè)計(jì)、閾值線劃定、樣本中抑制物等等。
當(dāng)然如果上述問(wèn)題都可以盡量?jī)?yōu)化到*佳程度，qPCR的定量也是可以做到比較準(zhǔn)確的。但是否有更好的方法，直接屏蔽這些問(wèn)題呢？那就是數(shù)字PCR！
自2008年**臺(tái)商業(yè)化數(shù)字PCR平臺(tái)問(wèn)世，數(shù)字PCR開(kāi)始正式走向廣大用戶(hù)。數(shù)字PCR技術(shù)是將含有核酸分子的反應(yīng)體系分成成千上萬(wàn)個(gè)納升級(jí)的微滴，其中每個(gè)微滴或不含待檢核酸靶分子，或者含有一個(gè)至數(shù)個(gè)待檢核酸靶分子。經(jīng)PCR擴(kuò)增后，對(duì)每個(gè)微滴進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)泊松分布原理及陽(yáng)性微滴的個(gè)數(shù)與比例即可得出靶分子的起始拷貝數(shù)或濃度。數(shù)字PCR是一個(gè)全新的**定量方式，與傳統(tǒng)定量PCR相比，其結(jié)果的精密度、準(zhǔn)確性和靈敏度更佳，結(jié)果不依賴(lài)Ct值，直接給出靶序列濃度，實(shí)現(xiàn)真正意義上的**定量。
全球數(shù)字PCR賽道，從2016年以后進(jìn)入活躍狀態(tài)，目前國(guó)內(nèi)外已發(fā)布幾十款產(chǎn)品。數(shù)字PCR*核心的技術(shù)是樣本的分割，根據(jù)分割方法主要可分為兩大派系，一是基于微孔板的芯片式分割，二是基于微流控技術(shù)的微滴生成式法。基于微孔板法分割會(huì)影響樣本均一性（微孔雖是大小均一，但是入孔的試劑體積無(wú)法**控制），進(jìn)而影響結(jié)果準(zhǔn)確性。目前以油包水的微流控液滴生成技術(shù)為市場(chǎng)主流，但微流控芯片的微通道對(duì)表面光潔度、表面能、表面活性劑等要求很高，且國(guó)內(nèi)沒(méi)有成熟配套的工業(yè)制造體系，使得整體成本還比較高。蘇州思納福采用的是一種全新的液滴生成方法——振動(dòng)注射技術(shù)，通過(guò)毛細(xì)管加樣針插入到油面下，快速擺動(dòng)的同時(shí)均勻向外排出液體形成微滴，液滴大小僅由流速和震動(dòng)頻率決定，生成的微滴體積精度高且體積可控，液滴批間一致性良好。2022年3月思納福DQ24數(shù)字PCR率先進(jìn)入創(chuàng)新醫(yī)療器械特別審查程序，有望成為國(guó)內(nèi)首批獲得三類(lèi)醫(yī)療器械注冊(cè)的數(shù)字PCR平臺(tái)。目前，IVD行業(yè)多家單位已使用Sniper設(shè)備進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品的制備和檢測(cè)，Sniper產(chǎn)品和技術(shù)在IVD質(zhì)控品領(lǐng)域得到了充分的認(rèn)可！
總的來(lái)看，數(shù)字PCR的設(shè)備價(jià)格和使用成本仍相對(duì)較高，2023年以來(lái)后疫情時(shí)代的經(jīng)濟(jì)形式下，有預(yù)算采購(gòu)這樣的儀器設(shè)備的企業(yè)明顯減少，而相關(guān)的定值需求仍然是大量存在的，外送技術(shù)服務(wù)成為一個(gè)更劃算的方案。杭州沃森生物于2021年開(kāi)始，基于思納福的DQ24全自動(dòng)數(shù)字PCR一體機(jī)，推出了數(shù)字PCR定量檢測(cè)技術(shù)服務(wù)，目前已為數(shù)十家企業(yè)和科研單位客戶(hù)提供服務(wù)。
杭州沃森生物數(shù)字PCR檢測(cè)服務(wù)服務(wù)周期短 ：1.5-2h檢測(cè)時(shí)長(zhǎng)
可多重檢測(cè) ： 6色熒光通道
靈敏度高 ：液滴有效率高、樣本有效利用率高
**度高 ：高效擴(kuò)增試劑，提高樣本檢測(cè)**度
試劑開(kāi)放 ：兼容客戶(hù)試劑體系，可采用在研IVD產(chǎn)品qPCR試劑，直接對(duì)比杭州沃森作為蘇州思納福簽約代理商，數(shù)字PCR試劑耗材成本更可控，服務(wù)價(jià)格更具競(jìng)爭(zhēng)力，歡迎來(lái)電咨詢(xún)：0571-86495259！
